毛發(fā)檢測在毒物分析、法醫(yī)鑒定里用得很廣。相比血液、尿液,它能反映更長時間的暴露信息,樣本也更穩(wěn)定。一根幾厘米長的毛發(fā),可能藏著數(shù)月的用藥或接觸記錄。但有一個繞不開的問題:毛發(fā)韌性太強(qiáng),前處理不好,后續(xù)檢測就很難準(zhǔn)。
最近我們在實驗室做了一批毛發(fā)研磨實驗,用一臺冷凍研磨儀把長發(fā)纖維處理成均勻粉末。整個過程下來,感受是方法對了,前處理其實沒那么難。
為什么要換思路?
毛發(fā)主要成分是角蛋白,纖維結(jié)構(gòu)堅韌,彈性還好。傳統(tǒng)做法是手工剪碎,再用普通研磨設(shè)備處理。聽起來簡單,實際動手才知道問題在哪。
1. 剪不均勻。手工剪出來的毛發(fā)長短不一,顆粒差異大,后續(xù)提取時溶出效率不穩(wěn)定。有的樣本可能已經(jīng)磨碎,有的還是長纖維,結(jié)果波動很難避免。
2. 容易升溫。常規(guī)研磨機(jī)沒有溫控,摩擦生熱會讓樣品變性,也可能造成纏繞成團(tuán)。溫度一高,目標(biāo)成分的穩(wěn)定性也會受影響。
3. 樣品研磨效率低。一批樣本做下來,時間全耗在前處理上,批量實驗很難展開。實驗室人力有限時,這個問題會更突出。
低溫研磨的思路正好反過來:把樣品快速降到低溫,角蛋白從韌變脆,研磨珠撞擊時更容易破碎。這也是為什么越來越多實驗室開始把冷凍研磨引入毛發(fā)樣本處理。
實驗操作并不復(fù)雜
這次實驗用的是上海JXFSTPRP-CL冷凍研磨儀,配套適配器和氧化鋯珠。

冷凍研磨儀對毛發(fā)樣本前處理的研磨操作步驟如下:
1. 先把毛發(fā)剪成小段,連同研磨珠和試劑一起裝入研磨管。注意,樣品加珠子總體積不要超過研磨管的三分之二。
2. 然后將研磨管放入適配器,固定好后放進(jìn)儀器。
3. 啟動儀器,設(shè)置儀器運行的研磨時間、間歇時間、循環(huán)次數(shù)、頻率等參數(shù)。低溫環(huán)境下運行,摩擦升溫的影響被降到最低。
4. 程序結(jié)束后取出樣品,即可進(jìn)入后續(xù)檢測環(huán)節(jié)。
實驗操作注意事項:
1. 樣品量不能貪多。研磨管裝得過滿,研磨珠的運動空間受限,反而磨不細(xì)。控制在三分之二以內(nèi),是最穩(wěn)妥的。
2. 毛發(fā)一定要剪短。如果直接放長毛發(fā)進(jìn)去,容易纏在管壁和珠子上,造成研磨死角。
3. 韌性特別強(qiáng)的樣品,可以先把適配器或研磨管放入液氮中預(yù)冷。低溫下角蛋白變脆,更容易破碎成細(xì)粉。
冷凍研磨儀對毛發(fā)樣本前處理研磨的實驗效果圖:

研磨前是成束的毛發(fā)纖維,又長又韌,直接處理很費勁。研磨后樣品變成細(xì)膩的粉末狀,分散在溶液中,沒有明顯結(jié)塊。同一批12個通道,狀態(tài)一致性不錯,后續(xù)提取結(jié)果也更穩(wěn)定。從剪樣到出粉,整個過程控制在十分鐘左右,比之前手工加常溫研磨的方式省時不少。同一套參數(shù)能反復(fù)調(diào)用,不同批次之間的結(jié)果波動也會小一些。
毛發(fā)樣本前處理,核心訴求是把堅韌纖維變成均勻細(xì)粉,同時保證效率和重復(fù)性。上海凈信JXFSTPRP-CL冷凍研磨儀通過低溫研磨加高通量設(shè)計,比較好地解決了這幾個問題。
12個樣品獨立處理,減少交叉污染風(fēng)險;20組程序可設(shè),便于建立標(biāo)準(zhǔn)化流程。對需要批量處理毛發(fā)樣本的實驗室來說,這套方案是值得一試的。類似的思路也可以用于指甲、骨骼等堅韌生物樣本的前處理。

