還在為組織剪不碎、消化控不好、細(xì)胞死得多、懸液團塊多發(fā)愁?傳統(tǒng)手工制備小鼠肝臟、肺臟單細(xì)胞懸液,費時費力、重復(fù)性差、細(xì)胞活率低,直接拖慢單細(xì)胞測序、流式分析、原代培養(yǎng)等關(guān)鍵實驗。今天結(jié)合小鼠肝臟 + 肺臟實操案例,帶你看懂:一臺全自動單細(xì)胞懸液制備儀,如何把復(fù)雜組織解離變成省心、穩(wěn)定、高活率的標(biāo)準(zhǔn)化流程。

單細(xì)胞懸液制備儀裝機圖
01、傳統(tǒng)手工制備的3大痛點
1.操作繁瑣耗時長剪碎、吹打、消化、終止、過濾、洗滌全手動,一人做多樣本易出錯,全程至少 1–2 小時。
2.細(xì)胞活率與得率不穩(wěn)定力度不均、消化過度 / 不足、碎片過多,活率波動大,團塊干擾后續(xù)上機。
3.重復(fù)性差、難復(fù)現(xiàn)人為操作差異大,同一組織不同人做,結(jié)果天差地別,文章數(shù)據(jù)難復(fù)現(xiàn)。
02、核心優(yōu)勢
一鍵自動化:預(yù)設(shè)肝、肺等組織專用程序,放管→選程序→啟動,全程自動完成。
溫和解離:恒溫酶解 + 輕柔機械剪切,細(xì)胞活率更高、碎片更少。
結(jié)果穩(wěn)定:批次間一致性好,細(xì)胞得率與活率顯著提升,適配單細(xì)胞測序、流式、類器官培養(yǎng)。
多組織通用:小鼠肝、肺、腫瘤、脾、腎等組織均可高效處理。
03、小鼠肝臟/肺臟單細(xì)胞制備
實驗準(zhǔn)備:
試劑:專用消化酶、終止液、PBS、碎片去除劑
耗材:2 mL 消化管、100 μm 細(xì)胞濾網(wǎng)、離心管
儀器:全自動單細(xì)胞懸液制備儀
標(biāo)準(zhǔn)流程:
1、連接儀器電源,打開開關(guān),選好程序以備用。
2、消化酶和終止液提前用流動自來水解凍,讓其混合更加均勻。
3、小鼠斷頸處死后,取出肝臟部,放入有PBS的培養(yǎng)皿中,放在冰上。
4、將選取的肝臟、肺臟組織用PBS洗滌后,用眼科剪剪碎、放入2ml消化管中,加入1ml左右消化酶。

5、放到模塊上,選擇對應(yīng)程序,點擊運行開始。
6、時間結(jié)束后儀器自動停止。

7、用100um濾網(wǎng)過濾,加入終止液終止消化(消化液:終止液=1:1)
8、客戶要求未裂紅,加入500ulPBS+1ml碎片去除劑,離心后棄上清,然后洗細(xì)胞兩次。
9、最后加入少量無菌PBS打散混勻底部沉淀細(xì)胞,即可得到單細(xì)胞懸液。

小鼠肺(左)和小鼠肝臟(右)顯微鏡結(jié)果圖
04、適用場景全覆蓋
單細(xì)胞測序(scRNA-seq)、流式細(xì)胞術(shù)分析/分選、原代細(xì)胞分離與培養(yǎng)、類器官構(gòu)建、腫瘤異質(zhì)性研究、免疫細(xì)胞、干細(xì)胞相關(guān)實驗
05、總結(jié)
從組織塊→高質(zhì)量單細(xì)胞懸液,全自動單細(xì)胞懸液制備儀真正做到:省時、省力、穩(wěn)活率、高重現(xiàn)尤其適合小鼠肝臟、肺臟等軟組織批量處理,讓新手也能穩(wěn)定做出合格樣本。科研不內(nèi)耗,從標(biāo)準(zhǔn)化單細(xì)胞制備開始。

